乳酸杆菌培养常用培养基

MRS培养基

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM1175B CM0359B	MRS肉汤，MRS Broth(De Man,Rogosa,Sharpe) 培养乳酸杆菌	500g	9.6L	726元
CM1163B CM0361B	MRS琼脂，MRS Agar(De Man,Rogosa,Sharpe) 用于培养乳酸杆菌，最长保质期2年	500g	8.1L	382元
CM1153B	MRS琼脂(ISO配方) ，MRS Agar(De Man,Rogosa,Sharpe)(ISO)   用于培养乳酸杆菌，配方符合ISO 15214:1998	500g	7.5L	1488元

MRS肉汤 CM1175，原货号CM0359：

配方表

成分*	含量 g/L
蛋白胨	10.0
牛肉浸粉("Lab-Lemco"粉)	8.0
酵母提取物	4.0
葡萄糖	20.0
无水山梨醇单油酸酯	1ml
磷酸氢二钾	2.0
三水醋酸钠	5.0
柠檬酸三铵	2.0
硫酸镁•7H2O	0.2
硫酸锰•4H2O	0.05
pH 6.2±0.2 @25℃

 *可根据操作标准自行调整配方 

制备方法：   

取52g培养基至大约60℃的1L蒸馏水中，混匀至完全溶解。分装至容器中后，121℃高压灭菌15分钟。

产品描述：

MRS肉汤可用于乳酸杆菌的鉴定试验，如温度依赖性实验、4% NaCl生长实验以及0.4%阴离子去垢剂实验等。

储存条件和保质期

干粉培养基置于10-30℃条件下保存，在保质期之内使用。

制成培养基置于2-8℃条件下保存。

外观

干粉培养基：深麦色，呈干粉状。

制成培养基：琥珀色溶液。

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MRS琼脂，CM0361，新货号CM1163：

配方表

成分*	含量 g/L
蛋白胨	10.0
牛肉浸粉("Lab-Lemco"粉)	8.0
酵母提取物	4.0
葡萄糖	20.0
无水山梨醇单油酸酯	1ml
磷酸氢二钾	2.0
三水醋酸钠	5.0
柠檬酸三铵	2.0
硫酸镁•7H2O	0.2
硫酸锰•4H2O	0.05
琼脂	10.0
pH 6.2±0.2 @25℃

 *可根据操作标准自行调整配方 

制备方法：   

取62g至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解。分装至容器中后，121℃高压灭菌15分钟。

产品描述：

MRS培养基的配方有de Man, Rogosa and Sharpe发明，用来替代不太稳定的产品（番茄汁培养基），支持一般乳酸菌的良好生长，甚至在其他培养基中生长较弱的乳酸菌也能生长良好。它支持所有的乳酸菌大量生长，特别是生长缓慢又不容易生长的短乳酸杆菌和发酵乳杆菌。

MSR琼脂和MRS肉汤的设计是用来提高“产乳酸的细菌”的生长情况，比如乳酸杆菌属，链球菌属，片球菌属和明串珠菌属，这些菌在合适的条件下菌可以产生乳酸。这些细菌室革兰氏阳性，过氧化氢酶和氧化酶阴性，对其营养要求特别讲究。它们在微氧环境下的生长能显著提高。一般来说，“产乳酸的细菌”比其他微生物的生长延迟，而且菌落较小。它们在非选择性培养基上会过快生长，特别是在培养2-4天之后。

乳酸菌是微需氧菌，通常需要在有氧环境的固体培养基平板上培养。培养基表面或者次表面的菌落可以是紧凑装或羽毛状，并且是小的，不透明的，白色菌落。

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MRS琼脂(ISO)，货号CM1153：

配方表

成分*	含量 g/L
酪蛋白酶解物	10.0
肉提取物	10.0
酵母提取物	4.0
柠檬酸三胺	2.0
醋酸钠	5.0
七水硫酸镁	0.2
四水硫酸锰	0.05
磷酸氢二钾	2.0
无水山梨醇单油酸酯	1.08
葡萄糖	20.0
琼脂	12.4
Total 66.73g/L

 *可根据操作标准自行调整配方 

制备方法：   

取66.73g至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解。分装至容器中后，121℃高压灭菌15分钟。可以根据调节pH值来改变培养基的选择性。

产品描述：

MRS ISO琼脂的配方是根据ISO15214:1998中 Horizontal 方法而来，在30℃对嗜温乳酸菌的菌落计数中使用。 

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M17培养基

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM0817B	M17肉汤，MRS Broth 用于促进乳酸链球菌和其噬菌体的生长，以及酸奶中嗜热链球菌的选择性计数	500g	13.4L	1306元
CM0785B	M17琼脂， M17 Agar 用于促进乳酸链球菌和其噬菌体的生长，以及酸奶中嗜热链球菌的选择性计数	500g	10.4L	1828元

M17琼脂 CM0785

配方表

成分*	含量 g/L
胰蛋白胨	5.0
大豆蛋白胨	5.0
肉消化物	5.0
酵母粉	2.5
维生素C	0.5
硫酸镁	0.25
甘油磷酸钠	19.0
琼脂	11.0
pH 6.9±0.2 @25℃

 *可根据标准所示性能自行调整

使用说明：

将48.25g琼脂溶于950ml蒸馏水中，分装。121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃，加入50ml无菌乳糖溶液（10% w/v）。

10%（w/v）乳糖溶液：

将10g乳糖溶于100ml蒸馏水中。121℃高压灭菌15分钟，0.2μm滤膜过滤。

产品简介：

M17琼脂用于促进乳酸链球菌和其噬菌体的生长，以及酸奶中嗜热链球菌的选择性计数。

乳酸链球菌营养要求较高。与同型发酵菌相比，乳酸链球菌培养过程中要持续加入缓冲液以维持培养基pH。pH的稳定非常重要，因为较低的pH会影响乳酸链球菌的生长。

M17琼脂中的缓冲液为二钠磷酸甘油，在pH为5.7、30℃培养24小时的条件下仍具有缓冲作用。该缓冲液可以添加钙而不形成沉淀。含钙培养基用于乳酸链球菌噬菌体的检测。

Shankar 和Davies研究发现，由于二钠甘油的存在，M17可用于从酸奶中分离得到嗜热链球菌，保加利亚乳杆菌生长被抑制。M17琼脂一直被国际乳制品联合会用于酸奶中嗜热链球菌的选择性计数。

M17琼脂也适用于奶酪和酸奶的制造。因为30℃或22℃对牛奶的后续发酵影响很小。

M17的另一特性是能够检测出链球菌突变体是否具有乳糖发酵能力。突变体Lac形成的菌落较小。 

方法：

噬菌体检测：

噬菌体检测方法参见 Terzaghi 和 Sandine的详细介绍

酸奶中嗜热链球菌的检测：

1、酸奶样品混匀

2、秤取10±0.1g样品至于200ml玻璃容器中。

3、加入无菌的0.1%（w/v）蛋白胨溶液到样品中，直至将样品稀释到50g

4、准备一系列适宜浓度的酸奶十倍稀释液

5、①将适宜稀释度的样品涂布到M17琼脂上，以获得单菌落。

②将稀释液1ml至于预先准备的M17琼脂平板上，琼脂体积为14ml，温度为43°C±1°C

6、35°C培养48小时

7、24和48小时后检查平板。培养18-24小时时，嗜热链球菌菌落直径为1-2mm，培养48小时后菌落可见。保加利亚乳杆菌生长抑制或生长有限。

8、菌落计数

0.1%蛋白水制备如下：

LP0042胰蛋白胨	0.5g
LP0049蛋白胨	0.5g
蒸馏水1升

121℃高压灭菌15分钟

结果验证：

从牛制品分离出的嗜热链球菌可通过革兰氏染色（阳性）和过氧化酶实验（阴性）进行验证。

保存条件及有效期：

干粉培养基10-30℃保存，有效期内使用

在用培养基2-8℃保存

外观：

干粉培养基：麦秆色，粉末

制成培养基：麦秆色凝胶

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M17肉汤 CM0817

配方表

成分*	含量 g/L
胰蛋白胨	5.0
大豆蛋白胨	5.0
`Lab-Lemco’ powder 牛肉浸粉	5.0
酵母粉	2.5
维生素C	0.5
硫酸镁	0.25
甘油磷酸钠	19.0
pH 6.9±0.2 @25℃

 *可根据标准所示性能自行调整

使用说明：

将37.25g肉汤溶于950ml蒸馏水中，分装。121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃，加入50ml无菌乳糖溶液（10% w/v）。

10%（w/v）乳糖溶液

将10g乳糖溶于100ml蒸馏水中。121℃高压灭菌15分钟，0.2mm滤膜过滤。

产品简介：

M17肉汤与M17琼脂一起使用可用于检测噬菌体。M17肉汤中含有大量的缓冲剂，对培养物随后的代谢影响不大。

保存条件及有效期：

干粉培养基10-30℃保存，有效期内使用

在用培养基2-8℃保存

外观：

干粉培养基：麦秆色，粉末

制成培养基：麦秆色溶液

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TGEA培养基

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM0127B	胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂 Tryptone Glucose Extract Agar 检测乳制品的美国标准方法培养基	500g	20.8L	1764元

胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂，货号CM0127：

配方表

成分*	含量 g/L
牛肉提取粉("Lab-Lemco"粉)	3.0
胰蛋白胨	5.0
葡萄糖	1.0
琼脂	15.0
pH 7.0±0.2 @25℃

 *可根据操作标准自行调整配方 

制备方法：   

取24g培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解。121℃高压灭菌15分钟，在倒平板之前混匀。当原始样品的稀释度高于1:10时，可在每升培养基中加入10ml的无菌脱脂奶粉溶液LP0031.

产品描述：

这款培养基的配方来自于美国，被推荐用于水和乳制品中的平板计数。它同时可以检测乳制品中的嗜热菌。APHA标准方法里面，推荐使用无菌牛奶加入此培养基中，因此推荐加入LP0031溶液，当原始样品的稀释度高于1:10时。对于本培养基，在灭菌的时候不要过度灭菌是很重要的。

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