山梨醇麦康凯琼脂 (Sorbitol MacConkey Agar)

培养大肠杆菌O157的选择性培养基

山梨醇麦康凯琼脂 CM0813

配方表：

C-T添加剂 SR0172E

制备方法：

取51.5g培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃，混匀倒入无菌培养皿。

如果需要的话，根据SR0172的产品说明进行溶解，每500ml培养基加入1瓶SR0172E，加入冷却后的培养基中，混匀后再倒平板。

产品描述：

大肠杆菌O157被认为是出血性结肠炎的一个病因，是出血性腹泻、严重的腹部疼痛、溶血性尿毒症的病理特征菌。因此，它是一个特别重要的人病原体。

山梨醇麦康凯琼脂可以用来提取病理大肠杆菌O157.它的配方是由Rappaport and Henig的描述基础上而来，是根据3号麦康凯琼脂改变的，将其中的乳糖变为了山梨醇。大肠杆菌O157不发酵山梨醇，因此产生无色菌落。相比之下，大部分的大肠杆菌发酵山梨醇，形成粉色菌落。山梨醇麦康凯琼脂的有效性被March and Ratnam做过确认实验，他们的文章得出100%的灵敏度和85%的特异性，所以认为这款培养基是一款简单地，不昂贵的，快速的，可信的大肠杆菌O157的筛选培养基。

Chapman等人在山梨醇麦康凯琼脂中添加头孢克肟和亚碲酸钾，以增加培养基的选择性。这种浓度的亚碲酸钾将O157血清型与其他血清型区分出来，并抑制普罗威登斯菌和嗜水气单胞菌，头孢克肟抑制变形杆菌属。

在山梨醇麦康凯琼脂中添加头孢克肟和亚锑酸钾的方法再FDA 细菌学分析手册中有描述。

培养基35℃培养24小时，避免过长时间的培养。

可使用大肠杆菌O157乳胶凝集试剂盒DR0620，来快速鉴定可疑的O157菌落。

保存：

干粉培养基10-30℃保存，SR0172在0℃以下保存，效期之前使用。制成培养基在2-8℃保存，避免光的照射，最多保存2周。

更多该产品信息请见Oxoid网页

山梨醇麦康凯琼脂(含BCIG) CM0981

含有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)

配方表：

制备方法：

取51.6g培养基至1L蒸馏水中，混匀，121℃高压灭菌15分钟，混匀倒入无菌培养皿。

产品描述：

含有BCIG的山梨醇麦康凯琼脂（SMAC）含有两种大肠杆菌O157的选择性因子：对山梨醇的不发酵，β-葡萄糖苷酶的活性的出现。在一次对人工污染的肉类样品的测试中，含有BCIG的SMAC将大肠杆菌O157的失败检出的概率下降了36%。

这款培养基中的5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸(BCIG)是β-葡萄糖苷酶的底物，这种酶并不在O157大肠杆菌中常见。非发酵山梨醇，以及β-葡萄糖苷酶阴性的大肠杆菌O157生成麦色菌落。具有β-葡萄糖苷酶的微生物将分解BCIG底物，形成吲哚酚（或卤代酚），迅速形成不溶性染料或其类似物，导致明显的蓝绿色菌落。

在35-37℃培养24小时，查看麦色菌落，可以使用大肠杆菌O157乳胶凝集试剂盒DR0620或DR0102对可疑菌落进行确认。

大肠杆菌O157一般不发酵山梨醇，并且是β-葡萄糖苷酶阴性，因此形成无色菌落。大部分大肠杆菌其他血清型是β-葡萄糖苷酶阳性，可以发酵山梨醇，因此出现蓝色至紫色菌落。

如果高含量的革兰氏阴性菌需要被抑制，可以加入Cefixime-Tellurite (CT) Selective Supplement SR0172增加选择性。

SMAC with BCIG是一种 USDA/FSIS 认可的培养基，用来预鉴定Escherichia coli O157:H7/NM

质控菌株：

Escherichia coli O157:H7 (glucuronidase-negative) NCTC 12900    生长良好，无色菌落

Escherichia coli (glucuronidase-positive) ATCC® 25922           生长良好，蓝色/紫色菌落

Enterococcus faecalis ATCC® 19433                               被抑制

更多该产品信息请见Oxoid网页

头孢克肟鼠李糖山梨醇麦康凯琼脂基础 CM1005

CR-SAMC Agar Base，与SR0191E配成CR-SAMC Agar

配方表：

SR0191E：每小瓶含0.025mg头孢克肟，在每升培养基中加入0.05mg头孢克肟。

制备方法：

取28.25g培养基至500ml蒸馏水中，混匀后121℃高压灭菌15分钟。冷却到50℃，加入已经按照说明书溶解的1瓶SR0191E（每小瓶加入2ml无菌水），混匀后倒平板。

产品描述：

在山梨醇麦康凯琼脂SMAC中加入鼠李糖，增加了大肠杆菌O157在背景菌种的区分度。大约60%的不发酵山梨醇的大肠杆菌血清型（O157血清型除外）会发酵鼠李糖。头孢克肟的存在降低了竞争菌的数量，特别是变形杆菌属，它在非山梨醇发酵菌中经常占了很大的比重。

大肠杆菌O157一般不发酵山梨醇和鼠李糖，所以产生麦色菌落。但是，大部分不发酵山梨醇的其他血清型大肠杆菌发酵鼠李糖，这些菌落为红色或粉色。

CR-SCAM与选择性更强的CT-SACM联用，可以使增菌肉汤中的大肠杆菌O157的恢复率更高。

培养基在35-37℃培养24小时

更多该产品信息请见Oxoid网页

改良胰蛋白胨大豆肉汤 (Tryptone Soya Broth Modified, mTS)

用于培养大肠杆菌O157的选择性增菌肉汤，可以添加合适的添加剂增加选择性

改良胰蛋白胨大豆肉汤基础 CM0989

配方表：

SR0190A VCC选择性添加剂：

SR0181E：每小瓶10mg万古霉素，每小瓶配500ml培养基。

制备方法：

取33g改良TSB至1L蒸馏水中，混匀，分装支最终容器中，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃后添加所需的添加剂。

产品描述：

mTSB是一种营养丰富的选择性肉汤基础，可以37℃震荡培养24小时，也有人43℃搅拌培养，使食品样品中的恢复率更佳。

缓冲蛋白胨水CM0509，添加SR0190，用来从牛肉的尸体，牛的粪便和牛奶和碎牛肉中提取大肠杆菌O157；

由SR0190E添加到CM0989中，组成EHEC enrichment broth (EEB)，克服了有些大肠杆菌O157的抗生素抗性。

Both BPW-VCC (CM0509+SR0190) and EEB (CM0989+SR0190) are incubated for 6hr at 37°C

Tryptone Soya Broth (CM0129)可以通过增加一些成分变为CM0989，添加4g/L的磷酸二氢钾，以及1.5g/L的胆盐。胆盐抑制孢子和肠球菌属，但能使大肠杆菌O157生长。VCC选择性添加剂含有三种抗生素，万古霉素抑制革兰氏阳性菌，头孢克肟抑制变形杆菌，头孢磺啶抑制假单胞菌。

更多该产品信息请见Oxoid网页