MAST CRYOBANK® 细菌保藏及维护系统
(菌种保藏管)
*每支小管中包含覆有特殊低温防腐溶液且经化学处理的珠子
*包装可放入冰冻架
*盖子上可标记所存菌株
*有色小管便于分类
可用于-20℃和-80℃菌种保藏,
菌种复苏时只需使用其中的一粒珠子,非常方便。
适用于所有需要对菌种进行保藏的实验室
MAST还供应一种18 孔冷库,可在使用过程中保持小管低温,货号CRYO/Z
使用方法:
CRYOBANK ADDITIONAL TECHNICAL INFORMATION
以下提供的方法是标准方法,按照以下方法操作将对于Cryobank厌氧菌的成功保存和复苏很有帮助。
将微生物保藏在管中
使用生长处于衰亡期和稳定期的微生物细胞,处于这个时期的细胞比年轻的或老的细胞具有更强的抗冷冻能力,这些细胞应生长在营养丰富的非选择性培养基上。
初始细胞数目越大,回复率越高。对于大多数细菌而言,确保足够的回复率大约要107/ml细胞量。在我们实验室,当保存苛求菌时,一般接种1支冷冻管需要4-5个平板。或者可以使用液体培养基进行培养,其中往往含有更多的细胞。
将细胞悬浮液和冷藏保藏液进行混合的时期称为平衡稳定时期。将菌悬液移入保藏管内,摇晃使充分混合,这个混合时间要在至少15分钟,不超过45-50分钟,混合后用无菌滴管吸去液体,然后置于冷库保藏。如果这个时间过长的话,那么冷藏液可能会对细胞产生毒性。
冷却速率也很重要,因为这将影响到冰晶的大小和形成速率。最有效的速率是1℃/min。菌种越难挑剔,所要求的冷却速率就越一致。
微生物从保藏管的复苏
当你从管中取珠子时,一定要注意不能让冷藏管融化,保持冷冻的环境。Cryoblock(货号CRYO/Z)的使用是必要的,因为一小瓶仅需要1分钟就会融化到-20℃
当从管中取珠子时,操作要尽可能的快确保冷藏管不融化,不允许任何其他的珠子融化也是非常重要的。
取珠子时越快越好
将微生物培养在营养丰富的非选择性培养基上,对于厌氧菌而言,建议使用哥伦比亚培养基或补充5-7%的马血的营养琼脂。
保藏和保质期:
未开封使用的Cryobank在包装标签上的有效期之前可保存于10-25℃。避光保存。
菌种复苏:
1. 将Cryobank小管从冰柜中取出。不要让小管内融化。若一次取出多支小管可以使用CRYOBLOCK以防止融化现象。
2. 打开小管,用无菌针或无菌镊子取出一颗玻璃珠。
3. 在适合的环境中将玻璃珠放入合适的液体培养基中或在固体培养基上划线。
4. 将玻璃珠以污染材料的推荐处理方式安全地丢弃。
5. 合上小管,尽快放入冰柜。
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CRYO/Z: