支原体琼脂（Mycoplasma Agar）

用于选择性分离支原体

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM0401B	支原体琼脂基础 Mycoplasma Agar Base	500g	14.1L	1490元
SR0059C	支原体添加剂G Mycoplasma Supplement G	10小瓶	每小瓶80ml	1126元

支原体琼脂基础 CM0401

配方表：

成分*	含量 g/L
细菌学蛋白胨	10.0
牛肉浸粉（Lab-Lemco粉）	10.0
氯化钠	5.0
矿物质	0.5
琼脂	10.0
pH 7.8±0.2 @25℃

 *可根据标准需要自行调整

支原体添加剂G SR0059C

配方表：

成分	每小瓶含量	每升培养基含量
马血清	20.0ml	200.0ml
酵母粉(25% w/v)	10.0ml	100.0ml
乙酸亚铊	25.0mg	250.0mg
青霉素	20000IU	200000IU

配制方法：

取35.5g的CM0401培养基到1L蒸馏水中，加热溶解，分装培养基，每瓶80ml，121℃灭菌15分钟，冷却到50℃，每瓶培养基加入1瓶已安装说明书溶解的SR0059C。

肺炎支原体双向培养基（Mycoplasma pneumoniae Bi-phasic Medium）

用于选择性分离肺炎支原体

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM0401B	支原体琼脂基础 Mycoplasma Agar Base	500g	14.1L	1490元
SR0060C	支原体添加剂P Mycoplasma Supplement P 每瓶溶解至20ml，可配成10份的双向培养基	10小瓶	每小瓶配10份	1762元

支原体添加剂P SR0060C

配方表：

成分	含量
马血清	6.0ml
酵母粉(25% w/v)	3.0ml
乙酸亚铊	0.008g
葡萄糖	0.3
酚红	0.0012g
氯化亚甲基蓝	0.0003g
青霉素	12000IU
支原体肉汤基础CM0403	0.145g

配制方法：

往每瓶SR0060C中加入20ml无菌蒸馏水，混匀溶解。往10个小瓶中每个加入1ml的支原体琼脂基础，121℃灭菌15分钟。在上述10小瓶培养基中分别加入2ml溶解后的支原体添加剂P，即SR0060C。 

产品描述：

Oxoid支原体琼脂基础是一种基础培养基，加入合适的添加剂后，可以用来培养支原体。

Edward强调过在基础培养基中加入有毒物质的重要性，Lynn & Morton对加入琼脂培养基中的抑制剂也给予了特殊的重视。Oxoid的支原体培养基基础不用含有有毒物质和抑制剂，可以选择性地添加它们，同时它含有的矿物质优化了菌落的生长性能，同时也不会干扰培养基的澄清度。

Hayflick建议在培养基中加入10% v/v的25% w/v的面包酵母提取物，Lemcke则用Oxoid酵母粉LP0021加入。大部分的支原体需要富含血清的培养基，常用的是马血清(20% v/v)，猪或人血清可以替代马血清，但是人血清里面的抗体和抗生素会对培养基产生重要的影响。Edward建议将DNA加入培养基可以促进牛支原体和其他支原体的生长，在每升培养基中加入20mg脱氧核糖核酸钠（引述自Lemcke）。

为了阻止污染微生物阻碍生长较慢的支原体的生长，抗菌物质必须加入到培养基中。青霉素和乙酸亚铊是最常用的试剂，但是T-strain支原体对乙酸亚铊敏感。Hutchinson和 Fallon 报道说在培养基中加入1mg/ml的氨苄西林可以替代青霉素和乙酸亚铊。青霉素的添加量应该在50-500 units/ml，乙酸亚铊的添加量应该在1/2000到1/8000之间。如果要做T-Strain支原体的研究，就去除乙酸亚铊。

两种添加剂，支原体添加剂G SR0059和支原体添加剂P SR0060，可以优化支原体的生长情况。支原体添加剂G SR0059是一种一般的添加剂，由Hayflick的配方而来， 当加入到Oxoid支原体肉汤基础或者支原体琼脂基础后，就组成完全选择性培养基，促进需要甾醇的支原体的生长。

支原体添加剂P是一种液体添加剂，由Mycoplasma Reference Laboratory, CPHLS, Colindale报道的配方而来，与Oxoid支原体琼脂基础一起使用，组成双向培养基，用来分离和初步鉴定肺炎支原体。

许多种的支原体是需氧菌或兼性厌氧菌，但有些支原体喜欢微需氧条件（通过加入二氧化碳），或者喜欢严格厌氧。

致病性支原体菌株在35℃下生长最好，腐生菌株经常在22-30℃下生长，T-支原体的最佳生长温度是36℃.支原体属在pH 7.4-8.0生长最好，但是T-支原体最适在pH 6.0-6.5.

技术要点：

琼脂平板

使用Oxoid的支原体琼脂基础CM0041和添加剂SR0059制备好支原体琼脂平板（常用55mm平板）以培养样品。平板可在湿润的需氧环境，厌氧环境和 10% CO₂-90% N₂环境中培养。在培养7天后，用60倍的显微镜查看琼脂表面，并使用倾斜透射光。菌落特制是菌落表面中心会陷入，给人一种“煎鸡蛋”的外观形态。在进行鉴定之前有必要使用再培养对菌株进行纯化。

双向培养基

双向培养基由1ml的支原体琼脂基础和2ml 支原体添加剂P组成，双向培养基瓶可以与拭子或一小片痰一起35℃下培养最多3个月，任何由于真菌或者细菌的生长导致浑浊的培养基都必须被丢弃。

肺炎支原体的生长会发酵葡萄糖产酸，使亚甲基蓝还原，并且使酚红指示剂变黄色。出现这种颜色变化的培养基需要在琼脂培养基上进一步培养，可以用CM0401加SR0059C。

注意事项：

必须采取有效措施预防乙酸亚铊中毒；
不要使用醋酸铊培养基分离解脲支原体；
以下情况下可确证是否为支原体结果：
(1) 具有典型的形态
(2) 无血清介质中无菌落生长
(3) 菌落嵌入琼脂表面

更多该产品信息请见Oxoid网页

支原体肉汤（Mycoplasma Broth）

用于从临床样本种选择性分离培养支原体

货号	产品描述	规格	可配制培养基	公开价
CM0403B CM1166B	支原体肉汤基础 Mycoplasma Broth Base	500g	19.6L	684元
SR0059C	支原体添加剂G Mycoplasma Supplement G	10小瓶	每小瓶80ml	1126元

               

支原体肉汤基础 CM0403，新货号CM1166

配方表：

成分*	含量 g/L
细菌学蛋白胨	10.0
牛肉浸粉（Lab-Lemco粉）	10.0
氯化钠	5.0
矿物质	0.5
pH 7.8±0.2 @25℃

 *可根据标准需要自行调整

配制方法：

取25.5g的CM0403培养基到1L蒸馏水中，混匀溶解，分装培养基，每瓶80ml，121℃灭菌15分钟，冷却到50℃，每瓶培养基加入1瓶已安装说明书溶解的SR0059C。

注意事项：

乙酸亚铊有毒，必须采取有效措施预防中毒。

当肉汤中的指示剂发生颜色变化时，要立刻转移到琼脂上培养，以防pH的变化损害微生物。

该产品的具体信息请见Oxoid网页